La selección de células madre in vivo utilizando vectores espumosos cura la deficiencia de piruvato quinasa canina

La terapia génica mediante células madre hematopoyéticas ha curado inmunodeficiencias incluyendo la inmunodeficiencia combinada grave ligada al cromosoma X y la deficiencia de adenina deaminasa.

Para estas inmunodeficiencias las células corregidas tienen una ventaja selectiva in vivo y es suficiente un bajo número de células con genes modificados para proporcionar un beneficio terapéutico.

Se necesitan estrategias para transducir y/o expandir a largo plazo de manera eficiente la repoblación de células in vivo para el tratamiento de enfermedades que requieren niveles más altos de células corregidas, tales como hemoglobinopatías. Aquí hemos expandido células madre corregidas in vivo en un modelo canino de una enfermedad eritroide grave, la deficiencia de piruvato quinasa.

Metodología / principales hallazgos

Se utilizó un vector de virus espumoso (FV) que expresa la mutación P140K de metilguanina metiltransferasa (MGMTP140K) para la expansión in vivo de la repoblación de células hematopoyéticas corregidas. Los vectores FV son vectores de transferencia génica atractivos para la terapia génica de células madre hematopoyéticas, ya que transducen de manera eficiente células de repoblación y pueden ser más seguros que los vectores gamma-retrovirales utilizados más comúnmente.

Tras el trasplante con células madre transducidas ex vivo usando un vector FV-tricistrónico que expresa EGFP, piruvato quinasa de tipo R, y MGMTP140K, hemos sido capaces de aumentar el marcado de aproximadamente 3,5% a 33% en células mieloides repobladas a largo plazo dando lugar a una cura funcional.

Conclusiones / significado:

A continuación se describe una cura funcional de una enfermedad severa eritroide en un perro afectado usando la selección de células madre in vivo.

Además de proporcionar una cura potencial para los pacientes con deficiencia de piruvato quinasa, la selección in vivo utilizando vectores espumosos con MGMTP140K tiene un amplio potencial para varias enfermedades hematopoyéticas incluyendo hemoglobinopatías.